宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測方法對比

來源：發布時間：2025-08-19

LC-MS/MS 作為一種成熟可靠的蛋白質組分析技術，憑借其超高的分辨率與準確度在生物分析領域占據重要地位。該技術不僅能實現對低含量宿主細胞殘留蛋白（HCP）的定性檢測，還可通過建立專屬蛋白質譜庫準確鑒定 HCP 的具體種類，為深入解析殘留蛋白組成提供關鍵支撐。不過，其應用過程中面臨的關鍵挑戰在于，如何優化 LC-MS 方法以滿足 GMP 規范中對產品放行檢測的嚴格要求。在質譜檢測環節，通過引入表征清晰的內標與外標蛋白，能夠準確分析 HCPs 的整體組成，并有效鑒別其中具有潛在風險的高風險蛋白。這一技術手段不僅為開發產品專屬的 HCP ELISA 檢測方法提供有力數據支持，還能助力工藝優化升級，加速推動生物制品從研發到獲批上市的全流程進程。

宿主檢測方法替換需橋接驗證，確保新舊方法結果一致性與可比性。宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測方法對比

宿主細胞蛋白（HCPs）是生物制品生產過程中產生的關鍵工藝相關雜質之一，可導致患者不良的免疫反應、超敏反應，另外也存在導致產品蛋白的降解等問題，影響產品的安全性和有效性，是一項關鍵質控指標。HCPs殘留檢測應用常用的方法是ELISA法，操作簡單、靈敏度高，通量較高，是HCPs殘留檢測的日常放行檢方法，各國藥典規定了用酶聯免疫法進行HCPs殘留檢測。然而，ELISA 方法檢測HCP殘留仍面臨諸多挑戰。在實際的工藝生產過程中，宿主來源、生產工藝、純化方式、生產規模等因素均可能對HCPs的種類及復雜性產生影響。

E.coli克隆菌宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測抗體制備湖州申科生物目前已承接常見宿主類型的HCP定制化開發，如期交付率達到100%。

MDCK（Madin-Darby Canine Kidney，馬丁達比犬腎上皮細胞）細胞系是一種來源于犬腎的長久性細胞系，其被普遍用作流感病毒增殖與純化、流感疫苗生產等過程中的細胞基質。基于其易感性、高產高滴度、無適應性突變、易馴化等優勢，MDCK細胞成為公認的適合于流感病毒毒株分離和流感疫苗生產的細胞系。與其他產品雜質一樣，MDCK宿主殘留蛋白（HCP）可能對生物制品的安全性和有效性產生不利影響，因此在生產監測、產品放行等過程中需要對其進行定量研究并進行嚴格控制。SHENTEK^® MDCK HCP殘留檢測試劑盒（一步酶聯免疫吸附法）是湖州申科生物自主研發的、具有完全自主知識產權的、實現關鍵試劑全國產化的MDCK HCP通用檢測試劑盒。本試劑盒適用于基于MDCK細胞基質的病毒增殖及純化、疫苗生產等過程中MDCK宿主殘留蛋白的定量檢測。本試劑盒操作步驟少，快速，檢測專一性強，性能穩定可靠。

影響宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測結果的因素之一是操作規范。一方面，實驗人員的專業技能和經驗對檢測結果的準確性有很大影響。熟練的實驗人員能夠準確地進行樣品處理、試劑配制和儀器操作，減少人為誤差。另一方面，一個合理的HCP檢測方法，在開發及應用時，應當考慮操作的合理變動區間（即耐用性）并設置相質控，從程序上盡量消除人為誤差對結果的影響。此外，嚴格遵循標準操作流程（SOP）是確保檢測結果可靠性的關鍵。操作步驟的不規范可能導致結果的重復性差或誤差增大。目前，湖州申科已正式推出全自動化HCP ELISA檢測系統，可以完成從樣品制備、孵育、洗板至數據采集等一系列操作，結合實驗室信息管理系統（LIMS），可以實現“輸入即輸出”，減少流程誤差。

抗體覆蓋率評估屬于定性分析，要求是穩定性好，靈敏度高，與ELISA檢測的原理相似，確保結果準確可靠。

各國法規要求必須對生物藥品進行分析和純化，以將宿主細胞蛋白HCP降低到可接受的水平；即使終產品中痕量的宿主細胞蛋白HCP到達患者體內，尚不清楚特定的殘留蛋白質雜質是否會影響藥物的穩定性或免疫原性。關于HCP的限量標準，美國藥典推薦值為終產品的HCP水平1-100 ng/mg；中國藥典各論中E.coli菌體HCP應不高于蛋白質總量的0.10% (1000 ng/mg)，CHO細胞HCP應不高于蛋白質總量的0.05% (500 ng/mg)，假單胞菌HCP應不高于蛋白質總量的0.02% (200 ng/mg)。

抗體覆蓋率評估分析需要考慮不同方法間存在的差異，以及如何持續改進和評估方法實驗過程的質量控制。北京單抗藥物用宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測抗體覆蓋率驗證

宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測對保障生物制品安全性和有效性至關重要。宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測方法對比

湖州申科生物CHO-K1 HCP 殘留檢測試劑盒（一步酶聯免疫吸附法）基于固相酶聯免疫吸附分析法，適用于基于CHO-K1細胞生產的生物制品中宿主殘留蛋白的定量檢測。該分析方法通過在預包被抗CHO-K1HCPs綿羊多抗的酶標板中加入校準品或待測樣品、HRP標記的抗CHO-K1HCPs綿羊多抗進行共孵育。洗滌后，加入TMB底物進行顯色反應，再使用終止液終止酶催化反應。利用酶標儀在450nm波長下測讀吸光度，其吸光度與校準品或待測樣品中的HCPs濃度成正相關，通過校準品擬合的劑量-反應曲線即可計算得出待測樣品中HCPs的濃度。本試劑盒對待測樣品無需進行特殊處理，只需通過合適的稀釋比例進行適用性驗證即可直接使用。本試劑盒操作步驟少，快速，檢測專一性強，性能穩定可靠。

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標簽：宿主細胞殘留DNA檢測宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測

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