山東哪家公司提供EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒優(yōu)勢

EdU-488細(xì)胞增殖檢測試劑盒(MeilunEdUCellProliferationKitwithAlexaFluor488)，是一種利用核苷滲入法對細(xì)胞增殖情況進(jìn)行快速、簡單、高靈敏檢測的試劑盒。其原理為：試劑盒中的EdU(5-ethynyl-2′-deoxyuridine)是一種胸苷(T)類似物，EdU可以在在細(xì)胞周期的S期中替代胸苷摻入到新合成的DNA中；另一方面，EdU上的乙炔基能與疊氮化物(如熒光探針AlexaFluor488Azide)通過Cu+的催化發(fā)生共價(jià)反應(yīng)，形成穩(wěn)定的三唑環(huán)，該反應(yīng)非常迅速，被稱作點(diǎn)擊反應(yīng)(Clickreaction)(圖1)。通過點(diǎn)擊反應(yīng)，新合成的DNA會被綠色熒光標(biāo)記，然后通過檢測熒光信號實(shí)現(xiàn)細(xì)胞增殖的檢測。上海東寰向您介紹EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的好處。山東哪家公司提供EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒優(yōu)勢

為了與其他熒光共同使用，東寰生物提供多種染料供選擇，覆蓋常用檢測通道，方便您輕松選擇適合的染料，比較大限度地?cái)U(kuò)展第三方染色的適用范圍，比較大限度地滿足您的檢測儀器要求，完全解決您的實(shí)驗(yàn)難題。EdU細(xì)胞增殖檢測方法不需要劇烈的DNA變性操作，只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理，能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識別位點(diǎn)，更適合結(jié)合其他染料或蛋白標(biāo)記（如P65抗體）等進(jìn)行多重標(biāo)記，從而在細(xì)胞水平獲取更多的直觀多維特征信息，更適合深入開展細(xì)胞功能方面的研究。咨詢EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒廠家EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒多少錢？上海東寰告訴您！

細(xì)胞增殖是評價(jià)細(xì)胞活性、代謝、生理和病理狀況的重要指標(biāo)。EdU(5-Ethynyl-2′-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,其連有的炔烴基團(tuán)在天然化合物中很少見，能夠在細(xì)胞增殖時(shí)期代替胸腺嘧啶(T)摻入正在復(fù)制的DNA分子中,通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng)，把記到新合成的含有EdU的DNA上面，這樣就可以進(jìn)行高效快速的檢測出DNA復(fù)制活性，廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。傳統(tǒng)的免疫熒光染色（BrdU）檢測方法需要DNA變性、抗原修復(fù)、抗原抗體過夜孵育等復(fù)雜繁瑣的操作步驟。而EdU檢測方法不需要劇烈的DNA變性，只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理，能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識別位點(diǎn)，操作步驟更加快速、靈敏和準(zhǔn)確。

BrdU法和BeyoClick?EdU法檢測原理的比較。A.BrdU法需使用大分子的BrdU抗體，由于空間位阻，雙鏈DNA須變性后才能使BrdU抗體與BrdU結(jié)合。法使用小分子標(biāo)記的疊氮化物(Azide)，無需DNA變性，操作更便捷，兼容性好，檢測結(jié)果更加穩(wěn)定可靠。本試劑盒檢測快速。相對于BrdU法，本試劑盒采用BeyoClick?EdU法檢測新合成的DNA，所需時(shí)間縮短。經(jīng)本試劑盒處理后，增殖的細(xì)胞呈棕色，可以用普通光學(xué)顯微鏡進(jìn)行觀察。HeLa細(xì)胞用本試劑盒檢測細(xì)胞增殖的效果參見圖3。圖3.HeLa細(xì)胞用本試劑盒檢測細(xì)胞增殖的效果圖。無EdU組觀察不到棕色染色(左側(cè)一列)；EdU(10μM)孵育2小時(shí)組有明顯的棕色染色(中間一列)；而用10mM的DNA合成抑制劑羥基脲(Hydroxyurea)提前預(yù)處理0.5小時(shí)后，棕色染色減弱，說明DNA合成被抑制后，EdU的摻入被抑制(右側(cè)一列)。上海EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的發(fā)展趨勢。

該產(chǎn)品是采用成像檢測方法對貼壁細(xì)胞進(jìn)行檢測，適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EdU后進(jìn)行細(xì)胞涂片處理，固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進(jìn)行檢測。也可以應(yīng)用于流式細(xì)胞儀檢測。能夠在細(xì)胞增殖時(shí)期代替胸腺嘧啶(T)摻入正在復(fù)制的DNA分子中，通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng)，把熒光集團(tuán)標(biāo)記到新合成的含有EdU的DNA上面，這樣就可以進(jìn)行高效快速的檢測出DNA復(fù)制活性，廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究dU細(xì)胞增殖檢測試劑盒找哪家比較安心？上海東寰不錯。河南EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒供應(yīng)商

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注：1）培養(yǎng)時(shí)間取決于細(xì)胞的增殖速度和生長狀態(tài)；2）孵育時(shí)間至少2小時(shí)，可延長至24小時(shí)后再檢測也可以。4、以1×PBS清洗細(xì)胞兩次，每次5分鐘，以除去未摻入RNA的EU殘留。注：貼壁不牢的細(xì)胞可降低清洗強(qiáng)度。細(xì)胞的固定和通透1、每孔加入150μl細(xì)胞固定液，室溫培養(yǎng)30分鐘，棄固定液；注：1)該試劑盒配備了細(xì)胞固定液，也可以使用含4%多聚甲醛的PBS來進(jìn)行細(xì)胞固定；2)如果使用其他的細(xì)胞固定劑建議用DEPC水來配置，避免RNA酶降解細(xì)胞內(nèi)的RNA。2、每孔加入150μl2mg/ml甘氨酸，搖床孵育5分鐘；3、棄甘氨酸溶液，每孔加入300μlPBS洗液，室溫清洗5分鐘；4、每孔加入300μlTritonX-100細(xì)胞通透液，室溫通透10分鐘，棄細(xì)胞通透溶液；5、每孔加入300μlPBS洗液，室溫清洗5分鐘；EU染色1、通過用10：1去離子水稀釋10×反應(yīng)緩沖液進(jìn)行配制1×EU反應(yīng)緩沖液；2、按照溶解200mg緩沖添加劑溶于1ml去離子水的比例稱取適量的粉末進(jìn)行溶解，即為可用的緩沖添加劑的濃度，建議現(xiàn)用現(xiàn)配；注：緩沖添加劑為白色粉末，較難準(zhǔn)確稱量，稱量范圍可稍微放寬，但是不應(yīng)超過±20%，且該粉末較易氧化，使用后請旋緊管蓋，如試劑出現(xiàn)棕黃色，則需報(bào)廢或更換。山東哪家公司提供EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒優(yōu)勢