上海咨詢EdU細胞增殖檢測試劑盒說明書

熒光試劑請避光保存。反應緩沖液10X1ml催化劑溶液25x400ulTAMRA紅色熒光溶液400x25ul緩沖添加劑粉末200mgHoechstX20ul使用前須知該產品是采用成像檢測方法對貼壁細胞進行檢測，適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細胞可在孵育EdU后進行細胞涂片處理，固定后再采用貼壁細胞的染色流程進行檢測。也可以應用于流式細胞儀檢測。實驗步驟(以24孔板，HK2貼壁細胞為例)EdU標記(a)將細胞完全培養基中按照500:1的比例加入EdU溶液，制成2xEdU標記培養基；(b)提前將2xEdU標記培養基預熱，然后等體積加入到細胞原有培養基中，獲得lxEdU溶液，其中EdU的終濃度為10uM；注：1)我們不建議替換全部培養基，因為這樣可能會影響細胞增殖的速度；2)配置好的培養基建議現用現配，用量以沒過細胞為宜；(c)每孔加入300ul含EdU培養基孵育細胞2小時，棄培養基；注：1)培養時間取決于細胞的增殖速度和生長狀態；2)大多數**細胞以及粘附細胞系均可采用2小時的孵育時間(d)以lxPBS清洗細胞兩次，毎次5分鐘，以除去未摻入DNA的EdU殘留。注：貼壁不牢的細胞可降低清洗強度。細胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛細胞固定液，室溫培養30分鐘，棄固定液；(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸。上海東寰告訴您使用EdU細胞增殖檢測試劑盒的便捷性。上海咨詢EdU細胞增殖檢測試劑盒說明書

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注：1）培養時間取決于細胞的增殖速度和生長狀態；2）孵育時間至少2小時，可延長至24小時后再檢測也可以。4、以1×PBS清洗細胞兩次，每次5分鐘，以除去未摻入RNA的EU殘留。注：貼壁不牢的細胞可降低清洗強度。細胞的固定和通透1、每孔加入150μl細胞固定液，室溫培養30分鐘，棄固定液；注：1)該試劑盒配備了細胞固定液，也可以使用含4%多聚甲醛的PBS來進行細胞固定；2)如果使用其他的細胞固定劑建議用DEPC水來配置，避免RNA酶降解細胞內的RNA。2、每孔加入150μl2mg/ml甘氨酸，搖床孵育5分鐘；3、棄甘氨酸溶液，每孔加入300μlPBS洗液，室溫清洗5分鐘；4、每孔加入300μlTritonX-100細胞通透液，室溫通透10分鐘，棄細胞通透溶液；5、每孔加入300μlPBS洗液，室溫清洗5分鐘；EU染色1、通過用10：1去離子水稀釋10×反應緩沖液進行配制1×EU反應緩沖液；2、按照溶解200mg緩沖添加劑溶于1ml去離子水的比例稱取適量的粉末進行溶解，即為可用的緩沖添加劑的濃度，建議現用現配；注：緩沖添加劑為白色粉末，較難準確稱量，稱量范圍可稍微放寬，但是不應超過±20%，且該粉末較易氧化，使用后請旋緊管蓋，如試劑出現棕黃色，則需報廢或更換。EdU細胞增殖檢測試劑盒哪家好？上海東寰告訴您！

EdU與染料的共軛反應可以進行高效快速的細胞增殖檢測分析，可以有效地檢測處于S期的細胞百分數。與傳統的免疫熒光染色（BrdU）檢測方法相比，更簡單，更快速，更準確。EdU只有BrdU抗體大小的1/500，在細胞內更容易擴散，不需要嚴格的樣品變性（酸解、熱解、酶解）處理，有效地避免了樣品損傷，有助于在組織、的整體水平上觀測細胞增殖的真實情況，具有更高的靈敏度和更快的檢測速度。AdrianSalic特別強調：“與傳統的免疫熒光染色不同，EdU反應能在幾分鐘內完成，且不需要進行嚴格的樣品變性處理，使得組織成像更簡單易行。EdU細胞增殖檢測試劑盒廠家。安徽品質好的EdU細胞增殖檢測試劑盒廠家

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該產品是采用成像檢測方法對貼壁細胞進行檢測，適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細胞可在孵育EdU后進行細胞涂片處理，固定后再采用貼壁細胞的染色流程進行檢測。也可以應用于流式細胞儀檢測。建議染色完成后立即進行熒光顯微鏡拍照觀察；如果條件限制，請于4°C條件下避光濕潤保存3天之內完成拍照。若為細胞爬片或涂片，可使用抗熒光淬滅封片劑進行封片后于4°C條件下保存及拍照檢測。而EdU檢測方法不需要劇烈的DNA變性，只需溫和的細胞固定化和透化處理，能夠較好地保護細胞形態、DNA整體結構及細胞內抗原識別位點，操作步驟更加快速、靈敏和準確。上海咨詢EdU細胞增殖檢測試劑盒說明書